導語：ＲPA技術在結(jie)核分枝桿菌診斷的應用一文來源(yuan)于網友(you)上傳，不(bu)代表本站觀(guan)點，若需要(yao)原(yuan)創文章可咨詢客服老師，歡迎參考(kao)。

摘要:目的傳統的結核分枝桿菌鑒定方法周期時間長、敏感性較差，往往延誤患者的診斷和治療，隨著分子生物學的飛速發展，為了可以快速診斷結核分枝桿菌，本研究利用重組酶聚合酶擴增(ＲecombinasePolymeraseAmplification，ＲPA)技術建立快速的結核分枝桿菌檢測方法，為結核病患者的診斷和治療贏得寶貴時間。方法應用ＲPA技(ji)術(shu)對疑(yi)似肺結(jie)(jie)核(he)患者(zhe)(zhe)痰標(biao)本(ben)(ben)中(zhong)的(de)特異(yi)性核(he)苷酸片段進行檢測，利用衛生統(tong)計(ji)學檢驗ＲPA技(ji)術(shu)與(yu)傳統(tong)診(zhen)斷方法有(you)(you)無差異(yi)。結(jie)(jie)果80例(li)疑(yi)似肺結(jie)(jie)核(he)患者(zhe)(zhe)的(de)痰標(biao)本(ben)(ben)中(zhong)檢測出70例(li)陽(yang)(yang)性，有(you)(you)10例(li)排(pai)除(chu)結(jie)(jie)核(he)病。80例(li)疑(yi)似肺結(jie)(jie)核(he)患者(zhe)(zhe)的(de)痰標(biao)本(ben)(ben)中(zhong)，ＲPA技(ji)術(shu)檢測陽(yang)(yang)性率(lv)(lv)為87.50%，痰涂片檢測陽(yang)(yang)性率(lv)(lv)為56.25%，痰培(pei)養(yang)檢測陽(yang)(yang)性率(lv)(lv)為75.00%，ＲPA技(ji)術(shu)檢測陽(yang)(yang)性率(lv)(lv)較(jiao)高，與(yu)痰涂片、痰培(pei)養(yang)比較(jiao)，差異(yi)均有(you)(you)統(tong)計(ji)學意義(χ2=25.00，P＜0.01;χ2=10.00，P＜0.01)。結(jie)(jie)論(lun)ＲPA技(ji)術(shu)的(de)成功建立對結(jie)(jie)核(he)病的(de)快速(su)診(zhen)斷有(you)(you)著(zhu)重要意義。

關鍵詞:重組酶(mei)聚(ju)合酶(mei)擴(kuo)增;結核(he)分枝桿菌;特異性;診斷;檢測(ce)

結(jie)核(he)(he)(he)病(bing)(tuberculosis)是由結(jie)核(he)(he)(he)分枝桿菌(Mycobacte-riumtuberculosis，MTB)引起的(de)(de)一種古老的(de)(de)慢性(xing)傳染(ran)(ran)病(bing)，以肺(fei)部(bu)(bu)感染(ran)(ran)最為(wei)常見(jian)(jian)［1］。2019年世(shi)界衛生(sheng)組織(zhi)統(tong)計，全(quan)球報告(gao)結(jie)核(he)(he)(he)病(bing)患(huan)(huan)者(zhe)(zhe)710萬(wan)例，與估算(suan)的(de)(de)1000萬(wan)例有(you)(you)所差異，可(ke)能與大部(bu)(bu)分患(huan)(huan)者(zhe)(zhe)未被(bei)(bei)診(zhen)(zhen)(zhen)斷(duan)(duan)(duan)(duan)出來有(you)(you)關［2］，可(ke)見(jian)(jian)結(jie)核(he)(he)(he)病(bing)的(de)(de)診(zhen)(zhen)(zhen)斷(duan)(duan)(duan)(duan)存在一定的(de)(de)難度。肺(fei)結(jie)核(he)(he)(he)是結(jie)核(he)(he)(he)病(bing)中具(ju)有(you)(you)傳染(ran)(ran)性(xing)的(de)(de)一類，臨(lin)床上(shang)對這類患(huan)(huan)者(zhe)(zhe)的(de)(de)診(zhen)(zhen)(zhen)斷(duan)(duan)(duan)(duan)主要通(tong)過痰涂片法(fa)(fa)和痰培(pei)養法(fa)(fa)，按照世(shi)界衛生(sheng)組織(zhi)的(de)(de)統(tong)計，臨(lin)床上(shang)的(de)(de)診(zhen)(zhen)(zhen)斷(duan)(duan)(duan)(duan)率只有(you)(you)不(bu)到70%。由于部(bu)(bu)分患(huan)(huan)者(zhe)(zhe)未得到及時診(zhen)(zhen)(zhen)斷(duan)(duan)(duan)(duan)，使其成為(wei)持續的(de)(de)傳染(ran)(ran)源，發病(bing)數持續增加。基于此(ci)，需改進現有(you)(you)的(de)(de)診(zhen)(zhen)(zhen)斷(duan)(duan)(duan)(duan)方法(fa)(fa)，以提(ti)高結(jie)核(he)(he)(he)病(bing)的(de)(de)診(zhen)(zhen)(zhen)斷(duan)(duan)(duan)(duan)率。重(zhong)組酶聚合酶擴增(ＲecombinasePolymeraseAmplification，ＲPA)技(ji)術被(bei)(bei)稱為(wei)是可(ke)以替(ti)代PCＲ技(ji)術的(de)(de)核(he)(he)(he)酸(suan)檢測(ce)技(ji)術［3－7］。該技(ji)術對硬(ying)件(jian)設備的(de)(de)要求很低，特別(bie)適合用于體外診(zhen)(zhen)(zhen)斷(duan)(duan)(duan)(duan)、獸醫、食品(pin)安全(quan)、生(sheng)物防御、農業等領域［8－11］。本研究利用ＲPA技(ji)術建立結(jie)核(he)(he)(he)分枝桿菌的(de)(de)快速檢測(ce)方法(fa)(fa)，現報告(gao)如(ru)下(xia)。

1材料與方法

1.1材料結(jie)核分(fen)(fen)(fen)枝桿菌(jun)(jun)(jun)標(biao)(biao)準株(zhu)H37Ｒv由(you)中(zhong)國(guo)疾病預防控制中(zhong)心(xin)(xin)提(ti)(ti)(ti)供，該研究(jiu)涉及的(de)菌(jun)(jun)(jun)株(zhu)標(biao)(biao)本和痰標(biao)(biao)本均來源于(yu)邯鄲市第六醫院;引物與探針(表1)交由(you)上(shang)海生工(gong)有限公(gong)司(si)合成;DNA提(ti)(ti)(ti)取(qu)采用(yong)(yong)江蘇碩(shuo)世公(gong)司(si)的(de)磁珠提(ti)(ti)(ti)取(qu)試劑盒(he)，ＲPAMasterMix購自濰坊安普未(wei)來生物科技有限公(gong)司(si)，培養(yang)(yang)基選用(yong)(yong)珠海貝索的(de)酸(suan)(suan)性羅氏培養(yang)(yang)基和中(zhong)性羅氏培養(yang)(yang)基。1.2儀器(qi)西安天隆(long)Ｒeal－timePCＲ儀，江蘇碩(shuo)世全(quan)自動核酸(suan)(suan)提(ti)(ti)(ti)取(qu)儀，熱電培養(yang)(yang)箱(xiang)。1.3方(fang)法(fa)1.3.1痰涂(tu)片鏡檢(jian)抗(kang)酸(suan)(suan)染色［12］，用(yong)(yong)玻片夾夾持涂(tu)片標(biao)(biao)本，滴加(jia)(jia)石炭(tan)酸(suan)(suan)復紅2～3滴，在火焰(yan)高(gao)處(chu)徐(xu)徐(xu)加(jia)(jia)熱，切勿(wu)沸騰，出現蒸(zheng)(zheng)汽即暫(zan)時離(li)(li)開(kai)，若染液(ye)(ye)蒸(zheng)(zheng)發減少，應(ying)再加(jia)(jia)染液(ye)(ye)，以免干(gan)涸，加(jia)(jia)熱3～5min，待標(biao)(biao)本冷卻后(hou)用(yong)(yong)水(shui)(shui)沖洗。3%鹽酸(suan)(suan)酒精脫色30s～1min，用(yong)(yong)水(shui)(shui)沖洗。用(yong)(yong)堿性美蘭溶液(ye)(ye)復染1min，水(shui)(shui)洗，用(yong)(yong)吸水(shui)(shui)紙吸干(gan)后(hou)用(yong)(yong)油鏡觀察(cha)。1.3.2分(fen)(fen)(fen)離(li)(li)培養(yang)(yang)取(qu)目標(biao)(biao)痰液(ye)(ye)經4%氫氧化(hua)鈉溶液(ye)(ye)消化(hua)處(chu)理15min后(hou)，酸(suan)(suan)性羅氏培養(yang)(yang)基37℃培養(yang)(yang)7周，分(fen)(fen)(fen)離(li)(li)得到(dao)菌(jun)(jun)(jun)株(zhu)。1.3.3DNA制備取(qu)1ml菌(jun)(jun)(jun)懸液(ye)(ye)或痰液(ye)(ye)于(yu)1.5ml離(li)(li)心(xin)(xin)管中(zhong)，7500rpm離(li)(li)心(xin)(xin)10min，棄上(shang)清，加(jia)(jia)入(ru)(ru)180μl溶有溶菌(jun)(jun)(jun)酶(mei)的(de)緩沖液(ye)(ye)BL，充(chong)分(fen)(fen)(fen)混勻，低速離(li)(li)心(xin)(xin)，于(yu)37℃水(shui)(shui)浴溫育30min(溫浴期間每(mei)隔10min顛倒(dao)混勻一次(ci))。加(jia)(jia)入(ru)(ru)10μl蛋(dan)白(bai)酶(mei)K至樣(yang)(yang)品(pin)中(zhong)，充(chong)分(fen)(fen)(fen)混勻，低速離(li)(li)心(xin)(xin)，56℃水(shui)(shui)浴溫育10min。將(jiang)消化(hua)液(ye)(ye)全(quan)部加(jia)(jia)入(ru)(ru)到(dao)試劑板(ban)(ban)AT中(zhong)的(de)第1、7列中(zhong)。將(jiang)加(jia)(jia)入(ru)(ru)樣(yang)(yang)本的(de)試劑板(ban)(ban)AT放置(zhi)在核酸(suan)(suan)提(ti)(ti)(ti)取(qu)儀中(zhong)，試劑板(ban)(ban)AT的(de)缺口朝(chao)外。插入(ru)(ru)八聯磁棒套(tao)，關上(shang)試驗(yan)倉(cang)，按下(xia)設置(zhi)核酸(suan)(suan)提(ti)(ti)(ti)取(qu)程序，并選擇(ze)運行(xing)(xing)。1.3.4ＲPA反應(ying)體系每(mei)份反應(ying)液(ye)(ye)中(zhong)含有A反應(ying)液(ye)(ye)29.4μl，上(shang)、下(xia)游引物(10μmol/μl)各2μl，探針(10μmol/μl)2μl，滅菌(jun)(jun)(jun)水(shui)(shui)11.5μl，結(jie)核分(fen)(fen)(fen)枝桿菌(jun)(jun)(jun)DNA樣(yang)(yang)品(pin)2μl，反應(ying)液(ye)(ye)總(zong)體系50μl。1.3.5PCＲ反應(ying)條件39℃30s(×1)，39℃10s→39℃20s(×40)。1.3.6結(jie)果分(fen)(fen)(fen)析(xi)采用(yong)(yong)SPSS21.0對數據進行(xing)(xing)整理分(fen)(fen)(fen)析(xi)，采用(yong)(yong)χ2檢(jian)驗(yan)對不同(tong)檢(jian)測方(fang)法(fa)的(de)結(jie)果進行(xing)(xing)統計學分(fen)(fen)(fen)析(xi)，P＜0.05為差(cha)異有統計學意(yi)義(yi)。

2結果

2.1ＲPA技術檢(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)(ce)(ce)(ce)結果(guo)(guo)80例(li)疑(yi)似肺(fei)(fei)(fei)結核(he)(he)(he)患(huan)(huan)(huan)者(zhe)(zhe)(zhe)的(de)痰(tan)(tan)(tan)標(biao)(biao)(biao)本(ben)(ben)(ben)(ben)中(zhong)(zhong)檢(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)(ce)(ce)(ce)出70例(li)陽(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)(xing)(xing)，結果(guo)(guo)見(jian)圖1。對(dui)(dui)余下的(de)10例(li)患(huan)(huan)(huan)者(zhe)(zhe)(zhe)標(biao)(biao)(biao)本(ben)(ben)(ben)(ben)分(fen)別進(jin)(jin)行(xing)痰(tan)(tan)(tan)涂(tu)(tu)片以(yi)及痰(tan)(tan)(tan)培養(yang)，結果(guo)(guo)均為(wei)(wei)陰(yin)(yin)性(xing)(xing)(xing)(xing)(xing)，又對(dui)(dui)10例(li)患(huan)(huan)(huan)者(zhe)(zhe)(zhe)進(jin)(jin)行(xing)流行(xing)病學(xue)(xue)調(diao)查，綜合實驗(yan)(yan)結果(guo)(guo)可(ke)以(yi)排除結核(he)(he)(he)病的(de)可(ke)能。2.2痰(tan)(tan)(tan)涂(tu)(tu)片鏡檢(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)結果(guo)(guo)對(dui)(dui)80例(li)疑(yi)似肺(fei)(fei)(fei)結核(he)(he)(he)患(huan)(huan)(huan)者(zhe)(zhe)(zhe)的(de)痰(tan)(tan)(tan)標(biao)(biao)(biao)本(ben)(ben)(ben)(ben)進(jin)(jin)行(xing)痰(tan)(tan)(tan)涂(tu)(tu)片鏡檢(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)，陽(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)(xing)(xing)45例(li)，再進(jin)(jin)行(xing)ＲPA檢(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)(ce)(ce)(ce)，45例(li)患(huan)(huan)(huan)者(zhe)(zhe)(zhe)標(biao)(biao)(biao)本(ben)(ben)(ben)(ben)全(quan)部陽(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)(xing)(xing);對(dui)(dui)35例(li)涂(tu)(tu)片陰(yin)(yin)性(xing)(xing)(xing)(xing)(xing)的(de)標(biao)(biao)(biao)本(ben)(ben)(ben)(ben)進(jin)(jin)行(xing)ＲPA檢(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)(ce)(ce)(ce)，其中(zhong)(zhong)檢(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)出25例(li)陽(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)(xing)(xing)、10例(li)陰(yin)(yin)性(xing)(xing)(xing)(xing)(xing)。在80例(li)疑(yi)似肺(fei)(fei)(fei)結核(he)(he)(he)患(huan)(huan)(huan)者(zhe)(zhe)(zhe)的(de)痰(tan)(tan)(tan)標(biao)(biao)(biao)本(ben)(ben)(ben)(ben)中(zhong)(zhong)，ＲPA檢(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)(ce)(ce)(ce)陽(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)(xing)(xing)率(lv)(lv)(lv)為(wei)(wei)87.50%，痰(tan)(tan)(tan)涂(tu)(tu)片檢(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)(ce)(ce)(ce)陽(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)(xing)(xing)率(lv)(lv)(lv)為(wei)(wei)56.25%，ＲPA陽(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)(xing)(xing)檢(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)(ce)(ce)(ce)率(lv)(lv)(lv)較高，對(dui)(dui)兩種檢(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)(ce)(ce)(ce)方法(fa)進(jin)(jin)行(xing)配(pei)對(dui)(dui)設(she)(she)計的(de)χ2檢(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)驗(yan)(yan)，差異(yi)有(you)統計學(xue)(xue)意(yi)(yi)義(yi)(χ2=25.00，P＜0.01)。2.3痰(tan)(tan)(tan)培養(yang)結果(guo)(guo)80例(li)疑(yi)似肺(fei)(fei)(fei)結核(he)(he)(he)患(huan)(huan)(huan)者(zhe)(zhe)(zhe)的(de)痰(tan)(tan)(tan)標(biao)(biao)(biao)本(ben)(ben)(ben)(ben)中(zhong)(zhong)培養(yang)出60株結核(he)(he)(he)分(fen)枝(zhi)桿菌。與ＲPA技術比較見(jian)表(biao)3。60例(li)培養(yang)陽(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)(xing)(xing)的(de)標(biao)(biao)(biao)本(ben)(ben)(ben)(ben)進(jin)(jin)行(xing)ＲPA檢(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)(ce)(ce)(ce)，全(quan)部陽(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)(xing)(xing)，對(dui)(dui)20例(li)痰(tan)(tan)(tan)培養(yang)陰(yin)(yin)性(xing)(xing)(xing)(xing)(xing)的(de)標(biao)(biao)(biao)本(ben)(ben)(ben)(ben)進(jin)(jin)行(xing)ＲPA檢(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)(ce)(ce)(ce)，其中(zhong)(zhong)檢(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)出10例(li)陽(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)(xing)(xing)、10例(li)陰(yin)(yin)性(xing)(xing)(xing)(xing)(xing)。在80例(li)疑(yi)似肺(fei)(fei)(fei)結核(he)(he)(he)患(huan)(huan)(huan)者(zhe)(zhe)(zhe)的(de)痰(tan)(tan)(tan)標(biao)(biao)(biao)本(ben)(ben)(ben)(ben)中(zhong)(zhong)，ＲPA檢(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)(ce)(ce)(ce)陽(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)(xing)(xing)率(lv)(lv)(lv)為(wei)(wei)87.50%，痰(tan)(tan)(tan)培養(yang)檢(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)(ce)(ce)(ce)陽(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)(xing)(xing)率(lv)(lv)(lv)為(wei)(wei)75.00%，ＲPA陽(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)(xing)(xing)檢(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)(ce)(ce)(ce)率(lv)(lv)(lv)較高，對(dui)(dui)兩種檢(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)(ce)(ce)(ce)方法(fa)進(jin)(jin)行(xing)配(pei)對(dui)(dui)設(she)(she)計的(de)χ2檢(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)(jian)驗(yan)(yan)，差異(yi)有(you)統計學(xue)(xue)意(yi)(yi)義(yi)(χ2=10.00，P＜0.01)。

3討論

肺(fei)結(jie)(jie)核患者(zhe)傳(chuan)(chuan)統診(zhen)(zhen)斷方(fang)法主(zhu)要有細菌(jun)(jun)學(xue)、免疫學(xue)和(he)分(fen)(fen)子生(sheng)物學(xue)。細菌(jun)(jun)學(xue)的(de)(de)(de)(de)臨床(chuang)診(zhen)(zhen)斷是(shi)(shi)傳(chuan)(chuan)染(ran)(ran)性(xing)肺(fei)結(jie)(jie)核患者(zhe)診(zhen)(zhen)斷的(de)(de)(de)(de)金標準，其中(zhong)(zhong)(zhong)主(zhu)要的(de)(de)(de)(de)診(zhen)(zhen)斷方(fang)法有痰涂(tu)(tu)片(pian)的(de)(de)(de)(de)抗酸(suan)染(ran)(ran)色(se)法和(he)結(jie)(jie)核分(fen)(fen)枝桿(gan)菌(jun)(jun)培(pei)養(yang)法。然(ran)而(er)，痰涂(tu)(tu)片(pian)抗酸(suan)染(ran)(ran)色(se)法的(de)(de)(de)(de)陽(yang)性(xing)率(lv)很低(di)，陽(yang)性(xing)率(lv)低(di)的(de)(de)(de)(de)原因(yin)主(zhu)要受(shou)痰標本質(zhi)量好(hao)(hao)壞的(de)(de)(de)(de)影響，因(yin)此陽(yang)性(xing)率(lv)的(de)(de)(de)(de)差別很大。細菌(jun)(jun)分(fen)(fen)離培(pei)養(yang)法的(de)(de)(de)(de)陽(yang)性(xing)率(lv)稍高(gao)(gao)于痰涂(tu)(tu)片(pian)抗酸(suan)染(ran)(ran)色(se)法，并(bing)且(qie)能(neng)夠(gou)分(fen)(fen)離得到(dao)活(huo)菌(jun)(jun)，但結(jie)(jie)核分(fen)(fen)枝桿(gan)菌(jun)(jun)的(de)(de)(de)(de)生(sheng)長速(su)度(du)(du)緩慢，檢測周期較(jiao)長，一般需(xu)要7周左右。隨(sui)著PCＲ技術(shu)突飛猛(meng)進的(de)(de)(de)(de)發展(zhan)，該技術(shu)被廣泛應用(yong)于臨床(chuang)實驗(yan)室診(zhen)(zhen)斷之(zhi)中(zhong)(zhong)(zhong)，具(ju)(ju)有靈(ling)敏、快(kuai)(kuai)(kuai)速(su)、特異的(de)(de)(de)(de)特點(dian)，能(neng)夠(gou)快(kuai)(kuai)(kuai)速(su)檢測不同類(lei)型的(de)(de)(de)(de)標本中(zhong)(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)(de)少量細菌(jun)(jun)，靈(ling)敏度(du)(du)較(jiao)高(gao)(gao)，而(er)且(qie)不受(shou)抗生(sheng)素使用(yong)的(de)(de)(de)(de)影響。但PCＲ技術(shu)無法避免地要經歷(li)變性(xing)、退火(huo)、延伸等熱循環步驟，并(bing)且(qie)需(xu)要具(ju)(ju)備昂貴(gui)的(de)(de)(de)(de)PCＲ擴增(zeng)(zeng)儀器才能(neng)實現(xian)核酸(suan)擴增(zeng)(zeng)，因(yin)此限制了其在(zai)基層單位(wei)以及現(xian)場簡(jian)陋(lou)條件(jian)下的(de)(de)(de)(de)應用(yong)，加之(zhi)擴增(zeng)(zeng)時(shi)間長、成(cheng)(cheng)本高(gao)(gao)，并(bing)不適合傳(chuan)(chuan)染(ran)(ran)病的(de)(de)(de)(de)現(xian)場檢測和(he)床(chuang)旁診(zhen)(zhen)斷［13］。目前Gene－XpertMTB/ＲIF技術(shu)已被應用(yong)在(zai)結(jie)(jie)核病的(de)(de)(de)(de)診(zhen)(zhen)斷中(zhong)(zhong)(zhong)，雖然(ran)可以提(ti)高(gao)(gao)診(zhen)(zhen)斷率(lv)，但該技術(shu)設備昂貴(gui)并(bing)且(qie)通量小，試劑封閉且(qie)較(jiao)貴(gui)，并(bing)未得到(dao)很好(hao)(hao)的(de)(de)(de)(de)應用(yong)推廣。因(yin)此，研究(jiu)和(he)發展(zhan)一種快(kuai)(kuai)(kuai)速(su)高(gao)(gao)效、操作簡(jian)便(bian)、靈(ling)敏可靠的(de)(de)(de)(de)檢測技術(shu)，對傳(chuan)(chuan)染(ran)(ran)病的(de)(de)(de)(de)診(zhen)(zhen)斷、治療和(he)疫情的(de)(de)(de)(de)控制具(ju)(ju)有重要意義。ＲPA技術(shu)是(shi)(shi)一種新型的(de)(de)(de)(de)等溫(wen)擴增(zeng)(zeng)技術(shu)，是(shi)(shi)目前全球較(jiao)新的(de)(de)(de)(de)等溫(wen)擴增(zeng)(zeng)檢測技術(shu)，其對硬件(jian)設備的(de)(de)(de)(de)要求很低(di)，尤其可以應用(yong)于傳(chuan)(chuan)染(ran)(ran)病的(de)(de)(de)(de)分(fen)(fen)子診(zhen)(zhen)斷中(zhong)(zhong)(zhong)［14－17］，且(qie)檢測時(shi)間短，只需(xu)5～20min就可以完成(cheng)(cheng)［18－20］。

作者：黃亮(liang) 胡朝輝(hui) 閆永飛(fei) 高騰 許夢捷 李(li)偉昊 趙(zhao)麗萍 單(dan)位(wei)：邯鄲市疾(ji)病預防控制中(zhong)心